RIPA buffer (投稿者: L.L.)

投稿日 : 2014年11月11日 | カテゴリー : 分子生物, 試薬調整

RIPA buffer

RIPA(Radio-Immunoprecipitation Assay) Bufferは、哺乳動物細胞の細胞質、細胞膜、核からタンパク質を抽出するために使用される最も汎用される細胞溶解バッファーです。

最終濃度
Tris-HCl (pH 8.0)　　　　　　　　50 mM
NaCl                                 　　 150 mM
Sodium deoxycholate                 0.5 %
Sodium dodecyl sulfate (SDS)     0.1 %
NP-40                                          1 %
EDTA                                           1 mM
PMSF                                           1 mM
プロテアーゼ阻害剤　　　　　　　　　適宜

調整方法 (1 litter)
1M Tris-HCl pH8.0                                 50 ml
5M NaCl                                             30 ml
Sodium deoxycholate                            5 g
Sodium dodecyl sulfate (SDS)                1 g
(または10％SDSを10ml)
NP-40                                                 10 ml
0.5M EDTA                                            2 ml
mess up to 1 litter

直前にPMSFや他のプロテアーゼ阻害剤を適宜加えて使用。

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