SDS-PAGE法によりタンパク質を電気泳動する際の、タンパク質の変性・SDS化に用いる。

最終濃度(2X)
・Tris-HCl(pH 6.8)                       0.1 M
・SDS                                           4 %
・2-mercaptoethanol                    12 %
・Glycerol                                    20 %

調整方法(2X)
0.5M Tris-HCl(pH 6.8)                 2 ml
10% SDS                                   4 ml
・2-mercaptoethanol                   1.2 ml
・Glycerol                                     2 ml
・1% BPB                                     数滴
H2Oで、10mlにメスアップ。
溶解後4度で保存。

備考
タンパク質溶解液に、等量の2Xサンプルバッファーを加えて、
95度5分加熱後、SDS-PAGEに使用する。
ジスルフィド結合を切断したくない場合(ゼラチンザイモグラフィー等)、還元剤2-mercaptoethanolを入れない。
2-mercaptoethanolの代わりにDTT(終濃度0.2M)を、Glycerolの代わりにSucrose(終濃度10%)を入れても構わない。
培養細胞から直接タンパク質を回収・SDS-PAGEする場合は、1Xサンプルバッファーを使用する。

みんなの評価 
1 Star2 Stars3 Stars4 Stars5 Stars (1 votes, average: 5.00 out of 5)
Loading...
※5段階の簡単評価です。★を選択することで誰でも簡単に評価できます。皆さんのご評価をお願いいたします。